Le prélèvement nasopharyngé est une procédure diagnostique couramment réalisée en pratique équine, utilisée pour identifier les agents infectieux affectant les voies respiratoires supérieures. Elle consiste à insérer un écouvillon nasal profond dans le nasopharynx afin de recueillir des échantillons pour des tests visant à détecter des agents pathogènes viraux ou bactériens.

Chez les chevaux présentant de la fièvre, un écoulement nasal, de la toux, une augmentation du volume des ganglions lymphatiques ou une baisse de performance, le prélèvement d’un échantillon au niveau du nasopharynx peut fournir des informations essentielles pour orienter les décisions thérapeutiques, les protocoles de biosécurité et les stratégies de gestion du troupeau.

Le nasopharynx est situé à l’arrière des passages nasaux, au-dessus du palais mou, et constitue un site important de colonisation des agents pathogènes et d’excrétion. De nombreuses maladies respiratoires équines contagieuses peuvent être détectées par l’échantillonnage de cette région, notamment l’herpèsvirus équin, la gourme et la grippe équine.

Comme les maladies respiratoires peuvent se propager rapidement au sein des populations équines, un prélèvement effectué de manière rapide et précise joue un rôle clé dans la protection des chevaux individuels ainsi que des troupeaux entiers. Comprendre quand et comment effectuer un prélèvement nasopharyngé aide les vétérinaires et les propriétaires de chevaux à réagir efficacement aux maladies respiratoires afin de maintenir une santé équine optimale.

Prélèvement nasopharyngé chez les chevaux

Le prélèvement nasopharyngé est une procédure diagnostique au cours de laquelle un écouvillon de culture stérile est inséré profondément dans les passages nasaux du cheval afin de recueillir des sécrétions respiratoires.

Les infections respiratoires entraînent généralement des modifications des sécrétions présentes dans les voies respiratoires supérieures du cheval. Les vétérinaires peuvent prélever ces sécrétions afin de diagnostiquer le type d’infection présent, obtenant ainsi des informations précieuses sur l’agent pathogène pour orienter le traitement.

Les signes d’infections des voies respiratoires supérieures chez les chevaux comprennent : [1]

  • Écoulement nasal
  • Enflure faciale
  • Haleine malodorante
  • Réduction du flux d’air par une ou les deux narines
  • Difficulté à respirer
  • Ganglions lymphatiques enflés autour de la tête
  • Augmentation du bruit lors de la respiration
  • Saignements de nez

Les vétérinaires peuvent prélever des sécrétions des voies respiratoires supérieures à partir de trois principaux sites chez les chevaux : [1][2]

  1. Passages nasaux et pharynx : La principale voie aérienne par laquelle l’air passe des narines vers le nasopharynx (gorge). Les vétérinaires utilisent des écouvillons pour recueillir des échantillons dans ces zones.
  2. Sinus paranasaux : Les grandes cavités aériennes à l’intérieur du crâne du cheval. L’obtention d’échantillons à cet endroit nécessite généralement une sinocentèse, consistant à percer avec une aiguille à travers l’os du crâne jusqu’au sinus.
  3. Poches gutturales : Les poches gutturales sont des extensions de la trompe auditive situées entre la gorge et l’oreille moyenne. L’accès aux poches gutturales nécessite une endoscopie, consistant à introduire une petite caméra dans le passage nasal. Le vétérinaire peut ensuite guider soigneusement l’endoscope dans les poches gutturales pour effectuer le prélèvement.

Le prélèvement nasopharyngé est le plus courant car il ne nécessite aucun équipement spécialisé et la région d’échantillonnage est facile d’accès.

Utilisations

Les vétérinaires utilisent des échantillons nasopharyngés pour détecter des virus, des bactéries ou des champignons dans les voies respiratoires. [3] Certaines maladies couramment diagnostiquées par prélèvement des voies respiratoires supérieures comprennent : [3][4]

« En prélevant un échantillon diagnostique tôt, nous pouvons identifier rapidement les agents pathogènes contagieux et prendre des décisions éclairées concernant le traitement et la biosécurité afin de protéger l’ensemble du troupeau. »

Dr. Fran Rowe DVM, PAS
Mad Barn Veterinary Nutritionist

 

Équipement

Un écouvillon nasopharyngé consiste à introduire un écouvillon de culture stérile dans la narine du cheval. Ces écouvillons mesurent généralement 20 à 40 cm (8 – 16 po) de long. L’échantillonnage est effectué rapidement et est généralement bien toléré par les chevaux sédatés.

Selon le test ou la maladie suspectée, le vétérinaire peut également effectuer un lavage nasopharyngé, dans lequel une solution saline stérile est injectée dans le nasopharynx puis récupérée pour analyse en laboratoire. Cette technique peut améliorer la collecte des échantillons et peut augmenter la probabilité de détecter certains agents pathogènes.

L’équipement supplémentaire requis pour le lavage comprend un long cathéter ou une pipette ainsi qu’une seringue pour administrer le liquide stérile. [3]

Autre équipement nécessaire pour la préparation des échantillons : [3]

  • Un milieu de transport pour culture bactérienne
  • Des tubes stériles pour l’entreposage
  • Des blocs réfrigérants
  • Un contenant en mousse pour l’expédition

De nombreuses maladies diagnostiquées par échantillonnage nasopharyngé sont hautement infectieuses. Compte tenu de cela, le personnel vétérinaire doit porter un équipement de protection individuelle approprié afin de prévenir la propagation de la maladie à d’autres chevaux avec lesquels ils peuvent travailler.

L’équipement de protection individuelle peut inclure : [3]

  • Des gants
  • Des bottes en plastique jetables
  • Des combinaisons jetables

Procédure

L’équipe vétérinaire sédation le cheval afin de minimiser les mouvements et la résistance pendant la procédure. Elle nettoie les narines avec de la gaze pour aider à éliminer tout écoulement nasal excessif pouvant contaminer l’écouvillon. [3]

Le vétérinaire mesure approximativement la distance entre la narine et l’œil du cheval afin de déterminer la longueur d’écouvillon nécessaire pour atteindre le nasopharynx du cheval. Il peut marquer l’écouvillon avec un marqueur afin de s’assurer que l’écouvillon est introduit suffisamment loin dans les voies respiratoires du cheval pour un échantillonnage efficace. [3]

Lorsque le vétérinaire est prêt, un manipulateur aide à immobiliser la tête du cheval en passant son bras autour du nez du cheval. Il peut également aider le vétérinaire en ouvrant davantage la narine afin de permettre un passage fluide de l’écouvillon. [3]

L’objectif est d’entrer dans le méat ventral de la narine, et non dans la « fausse narine », une poche de tissu en cul-de-sac située juste à l’intérieur du nez du cheval.

 

illustration de l’échantillonnage nasopharyngé équin incluant les structures nasales internes

Le vétérinaire insère l’écouvillon jusqu’à ressentir une résistance, ce qui indique qu’il a atteint le nasopharynx. Il maintient l’écouvillon en place pendant plusieurs secondes, afin de lui laisser le temps d’absorber les sécrétions. Ensuite, il retire l’écouvillon d’un mouvement rapide, en évitant que l’extrémité de l’écouvillon ne touche des surfaces. [3]

Selon les analyses que le vétérinaire souhaite effectuer, il peut être nécessaire de recueillir plusieurs écouvillons.

Certaines maladies sont mieux diagnostiquées à l’aide d’un lavage nasopharyngé, où un liquide est introduit dans les voies nasales. Le processus pour le lavage est similaire, mais au lieu d’introduire un écouvillon, le vétérinaire insère un cathéter ou une pipette dans la narine du cheval. [3]

Une fois en position, il fixe une seringue contenant une solution saline stérile et infuse la solution saline dans le passage nasal. [3] Ce liquide s’écoule immédiatement par les narines du cheval. Un autre membre de l’équipe vétérinaire recueille le liquide dans un sac ou un contenant en plastique.

Les écouvillons ou le liquide sont préparés pour l’envoi en les plaçant dans des tubes d’analyse stériles. Pour les écouvillons, l’équipe vétérinaire ajoute un milieu de transport qui permet à la croissance bactérienne ou virale de se poursuivre jusqu’à ce que l’écouvillon atteigne le laboratoire. [3]

Pour certains tests, une solution saline stérile suffit à maintenir les cellules recueillies humides pendant l’expédition. Avant l’expédition, l’équipe place les échantillons dans un contenant en mousse avec des blocs réfrigérants afin de s’assurer qu’ils restent froids pendant le transport. [3]

Interprétation des résultats

Les vétérinaires soumettent généralement des écouvillons nasopharyngés et du liquide de lavage pour des tests moléculaires, des types de tests diagnostiques qui détectent des fragments de matériel génétique de pathogènes.

Le test moléculaire le plus courant est la réaction en chaîne par polymérase (PCR). [4] Dans ce test, des fragments spécifiques d’ADN ou d’ARN appelés amorces se lient au matériel génétique du pathogène, s’il est présent. Le diagnosticien réplique ensuite ces fragments liés des milliers de fois, jusqu’à ce que l’ADN ou l’ARN puisse être détecté. [4]

Une réplication extensive permet la détection du pathogène même si seulement de très petites quantités sont présentes dans l’écouvillon ou le liquide d’échantillon. Certains tests PCR peuvent également quantifier la quantité de pathogène présente, ce qui peut aider les vétérinaires à déterminer la charge pathogène du cheval et le risque de propagation de l’infection à d’autres chevaux. [4]

La réalisation d’une PCR nécessite que le diagnosticien introduise une amorce spécifique à la maladie dans l’échantillon. Cela signifie que seules les maladies demandées apparaissent dans le rapport diagnostique.

Compte tenu de cela, la PCR est incapable d’identifier des maladies nouvelles ou des maladies pour lesquelles le vétérinaire n’a pas demandé de test. Cependant, le principal avantage de la PCR est qu’elle peut identifier des pathogènes qui ne se développent pas bien en laboratoire, comme les virus.

Les écouvillons nasopharyngés ou le liquide de lavage font partie intégrante du bilan diagnostique pour la gourme. L’agent pathogène responsable de cette maladie, Streptococcus equi equi, est une bactérie qui se développe bien en laboratoire.

La plupart des laboratoires diagnostiques utilisent la culture bactérienne pour diagnostiquer cette affection, car ce test diagnostique démontre que des bactéries vivantes et en réplication sont présentes dans l’échantillon. [4]

La PCR est incapable de distinguer entre des bactéries mortes et vivantes, donc l’identification de bactéries en réplication confirme une infection active. [4] Cependant, les résultats de culture bactérienne prennent généralement plus de temps que les résultats PCR, donc un test PCR initial peut être préférable pour obtenir un retour rapide sur la cause de l’infection en attendant que la culture bactérienne confirme une infection active. [4]

Des résultats faussement négatifs peuvent survenir pour la culture bactérienne et la PCR. Il s’agit de résultats où le test revient négatif, mais le cheval est infecté par le pathogène.
Une interprétation attentive du test diagnostique, dans le contexte des antécédents et des signes cliniques du cheval, est nécessaire pour établir un diagnostic. Dans certains cas, un résultat négatif peut amener votre vétérinaire à répéter le test afin d’aider à exclure un faux négatif potentiel. [4]

Les causes possibles d’un faux négatif comprennent : [3][4]

  • Échantillon de mauvaise qualité en raison de la résistance du cheval à la procédure
  • Mauvais positionnement de l’écouvillon ou du cathéter
  • Moment du prélèvement, puisque l’agent pathogène est généralement détectable seulement aux premiers stades de la maladie
  • Entreposage ou manipulation inadéquats pendant l’expédition

Préparer votre cheval pour le prélèvement nasopharyngé

Aucune préparation spécifique n’est nécessaire pour effectuer un prélèvement nasopharyngé chez un cheval. Toutefois, si l’on soupçonne que votre cheval est atteint d’une maladie infectieuse, il doit être mis en quarantaine à l’écart des autres chevaux.

Cela peut nécessiter l’aménagement d’une zone d’examen distincte sur votre propriété où le cheval peut être évalué en toute sécurité sans exposer les autres chevaux. Les chevaux éternuent ou soufflent souvent après le prélèvement, projetant de nombreuses particules infectieuses dans l’air.

Assurez-vous que la zone d’examen peut être désinfectée facilement et qu’elle ne comporte pas de surfaces poreuses comme un sol en terre, en sable ou en gravier, si possible.

Après le prélèvement, votre cheval doit retourner dans une zone de quarantaine jusqu’à ce que les résultats soient disponibles. Travaillez avec votre vétérinaire pour établir une zone de quarantaine appropriée sur votre ferme.

Certains vétérinaires peuvent demander que vous ameniez votre cheval à leur clinique pour un examen. Généralement, le cheval reste sur la remorque pendant le prélèvement afin de réduire le risque que des particules infectieuses contaminent la clinique vétérinaire. Demandez à votre équipe vétérinaire quelles sont les procédures appropriées une fois arrivé à la clinique. Ne déchargez pas votre cheval sans la permission de l’équipe vétérinaire.

Si vous avez manipulé votre cheval, vous pourriez potentiellement transmettre une maladie infectieuse à d’autres chevaux et animaux d’élevage. Évitez de vous déplacer sur la propriété de la clinique pendant que vous attendez le vétérinaire. Désinfectez vos mains avant de toucher les poignées de porte, les stylos ou les surfaces dans la clinique. Certaines cliniques peuvent vous demander d’appeler leur bureau pour vous enregistrer à votre arrivée plutôt que d’entrer dans le bâtiment.

 

Complications

L’échantillonnage nasopharyngé est une procédure sécuritaire avec des complications minimales.

Rarement, l’introduction de l’écouvillon ou du cathéter dans le passage nasal peut irriter les cornets ethmoïdaux. Il s’agit de composants délicats des passages nasaux du cheval qui contiennent de nombreux vaisseaux sanguins.

Si l’écouvillon ou le cathéter heurte les cornets ethmoïdaux, ils peuvent saigner abondamment, provoquant un saignement de nez. La plupart des saignements de nez se résolvent rapidement d’eux-mêmes et ne causent pas d’autres dommages au cheval. [3]

Questions fréquemment posées

Voici quelques questions fréquemment posées sur l’échantillonnage nasopharyngé chez les chevaux :

Résumé

Le prélèvement nasopharyngé est un outil diagnostique pratique utilisé pour identifier les causes infectieuses des maladies des voies respiratoires supérieures chez les chevaux et appuyer des décisions rapides en matière de traitement et de biosécurité.

  • Un écouvillon stérile ou un échantillon de lavage est prélevé du nasopharynx pour détecter des agents pathogènes viraux ou bactériens
  • Les cibles courantes comprennent la grippe équine, l’herpèsvirus équin, la gourme et d’autres maladies respiratoires contagieuses
  • Les échantillons sont généralement analysés à l’aide de la PCR ou d’une culture bactérienne selon l’agent pathogène suspecté
  • Une technique précise et une manipulation appropriée sont essentielles pour réduire le risque de résultats faussement négatifs
  • Un dépistage précoce aide à orienter les protocoles d’isolement et à limiter la transmission des maladies au sein des populations équines
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Références

  1. Walton. R. M. et al. Equine Hematology, Cytology, and Clinical Chemistry. 2nd ed. Wiley Blackwell, Hoboken. 2021.
  2. Reed. S. M. et al. Equine Internal Medicine. 3rd ed. Saunders Elsevier, St. Louis, Mo. 2010.
  3. Costa. L. R. R. and Paradis. M. R. Manual of Clinical Procedures in the Horse. Wiley Blackwell, Hoboken. 2018.
  4. Pusterla. N. and Higgins. J.Interpretation of Equine Laboratory Diagnostics. Wiley-Blackwell, Hoboken, NJ. 2017.